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酵母蛋白抽提试剂盒的注意事项有哪些?
更新时间:2015-08-18
浏览:1698次
1、*次使用
酵母蛋白抽提试剂盒
前应按照试剂瓶标签的说明在漂洗液中加入无水乙醇配制成工作液。
2、溶液YP1在使用前先加入RNaseA,将试剂盒中提供的RNaseA 全部加入,混匀,置于2-8℃保存。
3、质粒得率与酵母菌株、质粒拷贝数、培养条件等因素有关。通常酵母质粒拷贝数都很低,
酵母蛋白抽提试剂盒
一般通过电泳或分光光度计法都很难检测到,可通过PCR 或转化大肠杆菌来检测。
4、使用前请先检查溶液YP2和溶液YP3是否出现混浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,待溶液恢复澄清后再使用。
5、得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
6、洗脱缓冲液体积不应少于50ul ,体积过小影响回收效率;洗脱液的 pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH 值在8.0左右,可用NaOH 将水的pH 值调至此范围,pH 值低于7.0会降低洗脱效率;
酵母蛋白抽提试剂盒
在DNA产物应保存在-20℃,以防 DNA降解。这种方法针对双向电泳,杂质少,离子浓度小的特点!当然单向电泳也同样适用,只是电泳的条带会减少。
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